El coneixement microbià que desitgeu
Els microorganismes són un grup d'organismes diminuts que existeixen àmpliament a la natura i són invisibles a simple vista i s'han d'ampliar centenars, milers o fins i tot desenes de milers de vegades amb l'ajuda d'un microscopi òptic o electrònic. Tenen els avantatges de la mida petita, l'estructura senzilla, la reproducció ràpida, la variació fàcil i la gran capacitat d'adaptació a l'entorn.
Classificació dels microorganismes:
Hi ha molts tipus de microorganismes, almenys més de 100,000 tipus. Segons la seva estructura, la composició química i els hàbits de vida i altres diferències es poden dividir en tres categories.
El nucli de les cèl·lules microbianes eucariotes té un major grau de diferenciació, incloent la membrana nuclear, el nuclèol i els cromosomes; el citoplasma té orgànuls complets (com el reticle endoplasmàtic, el ribosoma i els mitocondris, etc.). Els fongs pertanyen a aquest tipus de microorganismes.
Les cèl·lules microbianes procariotes tenen un baix grau de diferenciació nuclear, només nucleoplasma primitiu, sense membrana nuclear i nuclèol; Els orgànuls no són gaire complets. Hi ha moltes espècies d'aquests microorganismes, com ara bacteris, espiroquetes, micoplasmes, rickettsia, clamídia i actinomicets.
Els microorganismes acel·lulars no tenen una estructura cel·lular típica ni un sistema enzimàtic per generar energia, i només poden créixer i reproduir-se en cèl·lules vives. Els virus pertanyen a aquest tipus de microorganismes.
Separació i purificació de microorganismes
Un cultiu microbià que conté més d'una espècie s'anomena cultiu mixt. Si totes les cèl·lules d'una colònia deriven d'una cèl·lula parental, la colònia s'anomena cultiu pur. En la identificació d'espècies bacterianes, generalment es requereix que els microorganismes utilitzats siguin cultius purs. El procés d'obtenció de cultiu pur s'anomena separació i purificació, i hi ha molts mètodes.
1. Mètode de la placa abocament
En primer lloc, la suspensió microbiana es dilueix en sèrie i una certa quantitat de la dilució es barreja completament amb el medi d'agar nutrient dissolt que es manté a uns 40-50 graus i, a continuació, la barreja s'aboca en una placa de Petri estèril. Després de la solidificació, la placa es va incubar cap per avall en una cambra constant. Es multiplica una sola cèl·lula per formar una colònia, es pren una sola colònia per fer una suspensió i els passos anteriors es repeteixen diverses vegades per obtenir un cultiu pur.
2. Mètode de placa plana de recobriment
En primer lloc, la suspensió microbiana es dilueix correctament i una certa quantitat de la dilució es col·loca en una placa d'agar nutrient estèril que s'ha solidificat, i després la dilució s'estén uniformement a la superfície del medi amb una espàtula de vidre estèril. Es pot obtenir una sola colònia per incubació a temperatura constant.
3. Mètode de traçat de plaques
La manera més senzilla d'aïllar els microorganismes és fer ratlles. Estireu una petita quantitat del cultiu a la placa amb un bucle estèril. Hi ha molts mètodes d'escriptura. Els mètodes de traçat comuns que tenen més probabilitats d'aparèixer una sola colònia són el mètode de la barra inclinada, el mètode de la corba, el mètode del quadrat, el mètode de la radiació i el mètode de les quatre quadrícules. Quan el bucle d'inoculació es mou cap enrere a la superfície del medi, el líquid bacterià del bucle d'inoculació es dilueix gradualment i, finalment, una sola cèl·lula es dispersa per la línia dibuixada. Després del cultiu, cada cèl·lula creix en una colònia.
4. Mètode de cultiu d'enriquiment
El mètode i el principi del mètode de cultiu d'enriquiment són molt senzills. Podem crear condicions que permetin que només creixin els microbis desitjats, i en aquestes condicions els microbis desitjats poden competir eficaçment amb altres microbis i superar amb escreix els altres microbis en termes de capacitat de creixement. Si s'han d'aïllar alguns paràsits obligats, les mostres s'han d'inocular a les poblacions de cèl·lules hoste susceptibles corresponents per créixer en gran nombre. Es poden obtenir bacteris paràsits purs mitjançant sembra repetida.
5. Mètode anaeròbic
Al laboratori, per aïllar alguns bacteris anaeròbics, es pot utilitzar un tub d'assaig que conté el medi original com a recipient de cultiu i el tub d'assaig es pot escalfar en un bany d'aigua bullint durant diversos minuts per expulsar l'oxigen dissolt al medi. . Després es refreda ràpidament i s'inocula. Després de la inoculació, es va afegir parafina estèril a la superfície del medi per aïllar el medi de l'aire. Un altre mètode és substituir el gas del medi amb N2 o CO2 després de la inoculació, i després segellar la boca del tub d'assaig sobre una flama. De vegades, per aïllar alguns bacteris anaeròbics de manera més eficient, la mostra aïllada es pot inocular al medi i, a continuació, la placa de Petri es pot col·locar en un dispositiu de cultiu anaeròbic completament segellat.
6. Mètode d'aïllament cel·lular (o espora única).
Es tracta d'utilitzar el mètode de microseparació per aïllar directament cèl·lules individuals o individus individuals de poblacions mixtes per al cultiu per obtenir un cultiu pur. Per a microorganismes més grans, es pot extreure un sol individu mitjançant un capil·lar. Per als microorganismes amb individus relativament petits, es requereix un micromanipulador per recollir cèl·lules o espores microbianes individuals amb un capil·lar o microagulla, ganxo, bucle, etc. sota el microscopi per obtenir un cultiu pur. El mètode de separació d'una sola cèl·lula té requisits relativament elevats sobre la tecnologia d'operació.
Cultiu microbià
1. Segons si es necessita oxigen durant el cultiu, es pot dividir en dues categories: cultiu aeròbic i cultiu anaeròbic.
Cultura aeròbica: també coneguda com a "cultura aeròbica". És a dir, quan aquest microorganisme es cultiva, necessita afegir oxigen, sinó no creixerà bé. Al laboratori, els cultius inclinats s'obtenen obtenint aire estèril de l'exterior mitjançant taps de cotó. La major part del cultiu líquid del matràs Erlenmeyer s'agita amb un agitador, de manera que l'aire exterior pugui entrar contínuament a l'ampolla.
Cultiu anaeròbic: També conegut com a "cultiu anaeròbic". Aquests microorganismes no necessiten oxigen per participar en el cultiu. En el procés de cultiu de microorganismes anaeròbics, el punt més important és eliminar l'oxigen del medi.
2. Segons l'estat físic del medi, es pot dividir en dues categories: cultiu sòlid i cultiu líquid.
Cultiu sòlid: és un mètode per inocular les soques en un medi sòlid solt i ric en nutrients, i cultivar microorganismes en condicions adequades.
Cultiu líquid: En els experiments, el cultiu líquid pot fer que els microorganismes es multipliquin ràpidament i obtinguin un gran nombre de cultius. En determinades condicions, també és un mètode eficaç per als microorganismes per seleccionar i enriquir bacteris.
BKMAM biotech proporciona els consumibles de laboratori corresponents per al cultiu microbià:
Plaques de Petri rodones/quadrades de plàstic d'un sol ús:
lMaterial de poliestirè d'alta transparència (PS);
lLa superfície és llisa i plana, i no hi ha distorsió òptica de les cèl·lules sota observació al microscopi;
l El disseny d'apilament facilita l'apilament i l'emmagatzematge;
l Esterilització per òxid d'etilè (EO);
l Resistència al desgast i a la corrosió.
Pal/bucle d'inoculació de plàstic d'un sol ús:
material de poliestirè (PS);
Anti-contaminació, endotoxines, DNases, RNases i lliures de pirògens;
L'embalatge independent ha estat esterilitzat;
Elaboració fina i especificacions completes;
Escampador de cèl·lules de plàstic d'un sol ús, difusor de bacteris:
material de poliestirè (PS);
Anti-contaminació, endotoxines, DNases, RNases i lliures de pirògens;
Disseny en forma de L, fàcil d'utilitzar;
Ús únic, lleuger i còmode.
Plaques d'especificacions d'acer inoxidable / estèrils d'un sol ús:
La placa d'especificacions d'acer inoxidable està feta d'acer inoxidable i la placa d'especificacions d'un sol ús està feta de polipropilè (PP) de qualitat alimentària.
Anti-contaminació, endotoxines, DNases, RNases i lliures de pirògens;
L'àrea d'untat està estrictament estandarditzada
Un costat de la placa d'especificacions està equipat amb un mànec, que és fàcil d'utilitzar
Paquet únic segellat estèril per evitar la contaminació secundària del mostreig i errors en els resultats
Ús únic per evitar la contaminació creuada i reduir la càrrega de treball
Benvingut a cooperar amb nosaltres
Sincerament
Michael Peng
michael@bkmbio.com